Tecnologie Ricombinanti

Anno accademico 2009/2010

Sommario insegnamento

• Obiettivi formativi
• Risultati dell'apprendimento attesi
• Programma
• Testi consigliati e bibliografia
• Note
• Strumenti didattici

Obiettivi formativi

Risultati dell'apprendimento attesi

Programma

Modulo Biologia Molecolare  (Prof.ssa Valeria Poli) - 2 CFU

Il programma si articolera’ su lezioni frontali seguite da attivita’ seminariali degli studenti sugli argomenti svolti a lezione. Gli argomenti delle tesine costituiranno oggetto di discussione e ulteriore approfondimento in classe.

•  Metodi per analizzare le interazioniproteina-proteina o proteina-acidi nucleici:

•     Ripasso dei concetti di base della regolazione della trascrizione.

•     Sistemi multimolecolari e modificazioni epigenetiche:

•    Basi molecolari del funzionamento dei fattori di trascrizione

Modulo Genetica Molecolare  (Prof.ssa Emanuela Tolosano) - 2 CFU

L’obiettivo del corso è l’analisi delle tecnologie che permettono l’identificazione di un gene-malattia e da questo la produzione di mutanti che mimino la patologia nel topo. Alla trattazione delle tecniche più comunemente usate segue l’analisi di alcuni esempi, tratti da lavori pubblicati recentemente. In dettaglio:

1)      Il “positional cloning”:

a)      costruzione di una mappa genetica

b)      costruzione di una mappa fisica

c)      correlazione tra mappa genetica e fisica ed identificazione del gene-malattia

2)      Introduzione di mutazioni nel topo:

a)      La produzione di topi transgenici classici:

i)        introduzione di mutazioni dominanti-negative

ii)       introduzione di mutazioni condizionali

b)      La tecnica della ricombinazione omologa in cellule ES:

i)        introduzione di mutazioni knockout

ii)       introduzione di mutazioni knockin

iii)     introduzione di mutazioni condizionali

3)      Analisi di mutanti per il gene codificante l’enzima PI3K

4)      Modelli murini di malattia di Alzheimer

5)      Modelli di analisi dello sviluppo dell’arto

R. Weaver, Biologia Molecolare, McGraw-Hill

H. Lodish e altri, “Biologia Molecolare della cellula”, Zanichelli

Ptashne e Gann, “Geni e segnali”, Zanichelli (per la parte che riguarda la regolazione della trascrizione)

Melino e Ciliberto (eds) Argomenti di Biologia Molecolare (Seu)

Bibliografia Modulo:
Phage display
Letture consigliate:
Azzazy and Highsmith, 2002, Clinical Biochemistry 35, 425-445
Cortese et al., 1996, Curr. Opinion in Biotechnology 7, 616-621
Trepel et al., 2002, Curr. Opinion in Chemical Biology 6, 399-404
Wiesehan and Willbold, 2003, ChemBioChem 4, 811-815

Lavori presentati a lezione e da preparare:
Rajotte et al., 1998, J. Clin. Invest. 102, 430-437
Mennuni et al., 1996, J. of Autoimmunity 9, 431-436
Puntoriero et al., 1998, EMBO J. 17, 3521-3533

Attameri:
Letture consigliate:
White et al., 2000, J. Clin. Invest. 106, 929
Bittker et al., 2002, Curr Opinion in Chemical Biology 6, 367-374

Lavori presentati a lezione e da preparare:
Hamm et al., 1997, PNAS 94, 12839-12844; Tuddenham, 2002, Nature 419, 23-24
Rusconi et al., 2002, Nature 419, 90-94

Trascrizione:
Letture consigliate:
Merika M, Thanos D. Curr Opin Genet Dev. 2001 11:205-8.
Nightingale et al., Curr Opin in Genet & Dev. 2006, 16:125-136
Fraser and Bickmore, 2007, Nature 447, 413

Lavori presentati a lezione e da preparare:
Agalioti et al Cell 2000
Agalioti et al. Cell 2002, 111, 381-392
Bosisio et al. EMBO J. 2006, 25, 798-810

BIBLIOGRAFIA PER LE LEZIONI DI LETTURA CRITICA:

Trascrizione
Saccani et al., J Exp Med 2001, 12, 1351

Phage display:
Chen et al., Chem&Biol 2004, 11, 1081
Sathaliyawala et al., J. Virol. 2006, 80, 7688
Riemer et al., J. National Cancer Institute 2005, 97, 1663
Myers et al., J. Immunol. 2000, 165, 3830
Chen et al., J. Infectious Disease 2006, 193, 625

Selex:
Bunka et al., JBC 2007, 282, 34500
Herr et al., Anal. Chem 2006, 78, 2918
Shangguan et al., PNAS 2006, 103, 11838

Modulo Genetica Molecolare:
H. Lodish e altri, “Biologia Molecolare della cellula”, Zanichelli
Gilbert, Scott F., “Developmental Biology”, Sinauer Associates, Inc. Sunderland, Massachusetts
Griffiths, A.J.F. e altri, ”Introduction to Genetic Analysis”, WH Freeman & Co, New York

Note

CI Tecnologie ricombinanti
-Modulo Biologia Molecolare (2 CFU) Prof.ssa Valeria Poli:
Ore frontali: 10
Modalità d’esame: La valutazione si basera’ sia sul seminario che su una prova orale.
Ore dedicate alla presentazione e discussione delle tesine: in media 10 ore per 30 studenti.

-Modulo Genetica Molecolare (2 CFU) Prof.ssa Emanuela Tolosano:
Modalità d’esame: Relazione di approfondimento dei temi trattati
Prova Scritta

• Materiale didattico
• Bacheca appelli
• Vai a Moodle
• Visita i forum